Efek Antimikroba dan Sitotoksisitas dari Nanopartikel Perak Sintesis dari Ekstrak Kulit Punica granatum
Abstrak
Untuk mengatasi tantangan yang berkembang dari mikroba yang resistan terhadap obat dan kejadian tumor, pendekatan sedang dilakukan untuk fitosintesis nanopartikel logam, khususnya nanopartikel perak, untuk mendapatkan ukuran perbaikan. Dalam penelitian ini, upaya telah dilakukan untuk memanfaatkan produk utama biowaste, kulit buah delima (Punica granatum ), untuk mensintesis nanopartikel perak. Nanopartikel perak (AgNPs) disintesis menggunakan ekstrak air kulit buah delima. Pembentukan AgNPs yang disintesis dikonfirmasi melalui spektroskopi UV-Vis, difraksi sinar-X (XRD), mikroskop elektron transmisi (TEM), mikroskop elektron pemindaian (SEM), dan spektroskopi sinar-X dispersi energi (EDX) serta melalui perubahan larutan tidak berwarna menjadi larutan coklat tua. Menggunakan spektroskopi UV-Vis, larutan coklat tua menunjukkan puncak pita resonansi Plasmon pada 378 nm dalam spektroskopi UV-Vis setelah bereaksi selama 24, 48, dan 72 jam. Laporan XRD mengungkapkan bahwa AgNPs memiliki struktur kubik. Laporan TEM dan SEM menunjukkan bahwa nanopartikel terdistribusi secara merata dalam larutan, dengan bentuk dan ukuran bulat mulai dari 20 hingga 40 nm dan dengan ukuran partikel rata-rata 26,95 nm. Pencitraan EDX juga mengkonfirmasi keberadaan AgNPs. AgNP yang disintesis ditemukan menunjukkan efek antimikroba yang baik pada bakteri Gram-negatif dan Gram-positif, terutama patogen Escherichia coli (ATCC 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27584), Proteus vulgaris (ATCC 8427), Salmonella typhi (ATCC 14028), Staphylococcus aureus (ATCC 29213), Staphylococcus epidermidis (MTCC 3615), dan Klebsiella pneumonia. Efek sitotoksik AgNPs juga diuji terhadap garis sel kanker usus besar (RKO:ATCC® CRL-2577™), dan diamati bahwa viabilitasnya masing-masing 56% dan 61% pada hari ke 3 dan 5, dengan paparan 12,5 g AgNP. Metode sederhana, ekonomis, dan ramah lingkungan ini menunjukkan bahwa AgNP yang dibiosintesis menggunakan ekstrak kulit buah delima mungkin merupakan solusi baru yang ampuh untuk pengembangan obat kanker usus besar yang juga memiliki aktivitas antibakteri.
Latar Belakang
Dalam beberapa dekade terakhir, semakin banyak penelitian tentang nanoteknologi, terutama yang melibatkan sintesis hijau dan karakterisasi nanopartikel, karena nanopartikel berukuran kurang dari 100 nm adalah agen yang ideal untuk penghantaran obat dan aplikasi biomedis [1]. Sintesis nanopartikel memegang peranan yang berpengaruh dalam beberapa bidang, antara lain nanoteknologi, bioteknologi, pengolahan kimia, metodologi fisik, rekayasa sistem, motor molekuler, nanokristal, dan nanobiomaterial [2]. Tiga metode produksi nanopartikel ada saat ini — rute kimia, fisik, dan "hijau", dengan rute hijau melibatkan penggunaan agen pereduksi biologis, termasuk ekstrak tumbuhan dan filtrat mikroba. Dua metode pertama seringkali mahal dan menghasilkan produk sampingan yang beracun, tetapi metode nanosintesis hijau telah diakui sebagai proses yang murah dan ramah lingkungan [3,4,5].
Dalam sintesis hijau NP, konstituen tanaman, termasuk protein, enzim, dan karbohidrat, digunakan untuk memformulasi nanopartikel yang dapat dengan mudah berinteraksi dengan biomolekul target [6]. Pendekatan sintesis nanopartikel perak ini mungkin memainkan peran penting dalam pengobatan masa depan untuk berbagai bentuk kanker atau penyakit lain yang dapat dikendalikan oleh phyto-nanotechnology [7, 8]. Bakteri gram negatif, seperti Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , dan Proteus vulgaris , dan patogen Gram-positif, seperti Staphylococcus aureus dan S. epidermidis , bertanggung jawab untuk sebagian besar infeksi yang didapat di rumah sakit [9]. Memang, infeksi bedah, termasuk pneumonia dan infeksi aliran darah, juga disebabkan oleh adanya bakteri Gram-positif dan Gram-negatif [10]. Sintesis AgNP yang dimediasi tanaman dapat membantu dalam pengembangan agen antibakteri yang efektif melawan patogen mikroba yang relevan dengan kesehatan masyarakat. Baru-baru ini, telah dicatat bahwa AgNP yang disintesis dapat memiliki hubungan sinergis dengan antibiotik levofloxacin, meningkatkan aktivitas antimikroba total [11]. Banyak peneliti telah melaporkan bahwa AgNPs yang disintesis mengandung sifat antimikroba yang terkenal terhadap patogen Gram-positif dan Gram-negatif, serta efek sitotoksik pada garis sel kanker dan sel normal yang berbeda [12,13,14]. Selain itu, AgNP sangat efisien karena rasio luas permukaan terhadap volume yang tinggi, dapat dengan mudah mengganggu, dan memiliki kemampuan untuk menembus sel bakteri jika dibandingkan dengan ion perak saja [13].
Studi saat ini difokuskan pada sintesis hijau AgNPs menggunakan ekstrak air Punica granatum kupas dan selidiki sifat antimikrobanya dengan menggunakan pelat gores dan pengukuran konsentrasi penghambatan minimum (MIC) setelah 24 jam inkubasi pada 37°C. Bakteri Gram-negatif E. koli (ATCC 25922), Hal. aeruginosa (ATCC 27584), Hal. vulgar (ATCC 8427), dan Salmonella typhi (ATCC 14028) serta bakteri Gram-positif Staphylococcus aureus (ATCC 29213), S. epidermidis (MTCC 3615), dan K. pneumonia dipelajari untuk menguji potensi penghambatan pertumbuhan oleh AgNPs yang disintesis. Selanjutnya, efek sitotoksik pada garis sel kanker usus besar (RKO:ATCC® CRL-2577™) diuji dan menunjukkan tingkat viabilitas sel sebesar 56% pada hari ke-3 dan 61% pada hari ke-5 dengan dosis 12,5 μg AgNPs.
Metode
Persiapan Ekstrak Kulitnya
Satu kilogram buah delima Saudi (Punica granatum —dibudidayakan di wilayah Taif Kerajaan Arab Saudi) dibeli dari supermarket di Riyadh, Arab Saudi. Buah dicuci beberapa kali dengan air keran dan kemudian dengan air suling ganda (DDH2 HAI). Setelah dicuci, kulitnya dihilangkan dengan hati-hati. Kulit buah delima dibilas dengan DDH2 O untuk menghindari kontaminasi permukaan dan dibiarkan kering sepenuhnya pada suhu kamar. Akhirnya, kulitnya digiling menjadi kekuatan yang halus. Sepuluh gram bubuk halus direndam dalam 100 mL DDH2 O selama 24 jam pada suhu kamar. Campuran yang dihasilkan disaring menggunakan kertas saring Whatman No. 1 untuk memperoleh ekstrak airnya. Seluruh proses dilakukan dalam kondisi steril.
Proses Sintesis AgNP
Perak nitrat (AgNO3; 0,1 mM) dicampur dengan 250 mL DDH2O. Kemudian, sepuluh mililiter ekstrak kulit delima berair ditambahkan, dan larutan tersebut dicampur secara menyeluruh menggunakan inkubator pengocok selama 5 menit. Campuran reaksi ditemukan berubah warna dari larutan tidak berwarna menjadi larutan berwarna coklat setelah 24 jam, yang menunjukkan reduksi ion perak menjadi nanopartikel perak. Solusi nanopartikel kemudian disentrifugasi pada 15.000 RPM selama 15 menit, dan proses ini diulang empat kali. Akhirnya, AgNP yang dimurnikan dikumpulkan, dan pengujian lebih lanjut dilakukan untuk menganalisis karakteristik dan aktivitas biologis dari NP yang disintesis. Ekstrak kulit berlebih disimpan pada suhu 4 °C untuk analisis lebih lanjut.
Karakterisasi AgNP
Pengurangan ion perak oleh ekstrak air kulit delima dipantau menggunakan spektrofotometer UV/Vis/NIR Perkin Elmer Lambda 950 24, 48, dan 72 jam setelah dimulainya reaksi dari 200 hingga 800 nm dan pada resolusi 1 nm . Pola XRD diperoleh dengan difraktometer sinar-X PANalytical yang mampu memindai kecepatan mulai dari 20 hingga 50 dengan 2θ dan digunakan untuk menentukan struktur kristal nanopartikel perak.
Analisis topografi permukaan dan komposisi AgNP dilakukan dengan menggunakan analisis TEM yang dilakukan pada JEOL JEM-1230 (JEOL, Tokyo, Jepang) dan JSM 6380 LA SEM, dengan resolusi 3,0 nm. Analisis unsur AgNP dilakukan dengan spektroskopi sinar-X dispersi energi (EDX) menggunakan seri JED 2200 (Jeol).
Studi Antibakteri
Persiapan Suspensi Bakteri
Strain bakteri E. koli (ATCC 25922), Hal. aeruginosa (ATCC 27584), Hal. vulgar (ATCC 8427), S. typhi (ATCC 14028), S. aureus (ATCC 29213), S. epidermidis (MTCC 3615), dan K. pneumonia diperoleh dari Rumah Sakit King Khalid, Riyadh, Kerajaan Arab Saudi. Identifikasi cepat sel bakteri dilakukan menurut metode yang diterbitkan sebelumnya [15]. Semua kultur yang teridentifikasi dipindahkan ke media agar dan disimpan pada suhu -20°C sampai diperlukan untuk penelitian. Pada saat itu, setiap strain bakteri diinokulasi ke dalam agar nutrien steril dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Penangguhan (10
6
CFU/mL) disiapkan dengan mentransfer satu lingkar inokulum dari biakan yang diinkubasi 24 jam ke dalam 5 mL kaldu nutrisi dan menginkubasinya pada suhu 37 °C selama 2 jam.
Pengujian Antimikroba
Uji aktivitas antimikroba dilakukan dengan menggunakan metode difusi sumur agar [16]. Sebuah swab steril dibasahi dengan suspensi bakteri segar dan disebarkan pada plat agar Muller-Hinton yang padat dan steril. Sumur dibuat di piring agar menggunakan penggerek gabus. Konsentrasi yang berbeda (25, 50, 75, dan 100 L) suspensi nanopartikel yang disintesis dituangkan ke dalam setiap sumur yang berurutan. Semua piring diinkubasi pada 37 ° C selama 24 jam. Zona hambat diukur (mm) di sekitar setiap sumur di setiap pelat yang diinkubasi. Untuk setiap percobaan, tiga ulangan dilakukan [17].
Analisis Proliferasi Sel
Efek AgNPs pada proliferasi sel dievaluasi menggunakan uji Alamar Blue seperti yang dijelaskan sebelumnya [12].
Singkatnya, 0,005 × 10
6
sel/sumur diunggulkan dalam pelat 96-sumur dengan konsentrasi AgNP yang berbeda (100–0,3 μg/mL) dan diinkubasi selama 2 hingga 5 hari pada suhu 37°C. Medium, DMEM, dilengkapi dengan 4500 mg/L d-glukosa, 4 mM l-glutamin, 110 mg/L natrium piruvat, 10% serum janin sapi (FBS), 1x penisilin-streptomisin, dan asam amino non-esensial (semua dibeli dari Gibco-Invitrogen, AS). Sumur kontrol diperlakukan dengan media saja, dan proliferasi sel diukur pada hari ke 3 dan hari ke 5. Pada titik waktu ini, Alamar Blue (1:10) ditambahkan ke setiap sumur, dan pelat diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 4 jam; kemudian, pelat dibaca menggunakan pembaca pelat mikro spektrofotometri (Biotek Synergy 2; Biotek Instruments, USA), dan unit fluoresensi relatif (RFU) dicatat.
Analisis Apoptosis/Nekrosis Sel
Untuk menentukan apoptosis/nekrosis, sel diperlakukan dengan AgNPs pada konsentrasi yang berbeda (25-1,5 g/mL). Pada hari ke 5, sel diwarnai dengan larutan pewarnaan fluoresen ganda (1 μL) yang mengandung 100 μg/mL AO (acridine orange) dan 100 μg/mL EtBr (ethidium bromide) (AO/EtBr, Sigma, St. Louis, MO ). Sel-sel yang diwarnai terkena larutan pewarna AO/EtBr (1:100) selama 1 menit dan diamati menggunakan mikroskop fluoresensi Nikon Eclipse Ti. Hasilnya dibandingkan dengan kontrol eksperimental. AO/EtBr, kombinasi dua pewarna, membantu memvisualisasikan sel dengan organisasi kromatin yang menyimpang. Penyerapan diferensial AO/EtBr memungkinkan identifikasi sel yang hidup dan tidak hidup. Khususnya, AO digunakan untuk memvisualisasikan jumlah sel yang telah mengalami apoptosis.
Analisis Statistik
Analisis statistik dan grafik dilakukan menggunakan Microsoft Excel 2010 dan perangkat lunak GraphPad Prism 6.0 (GraphPad, San Diego, CA, USA). P nilai dihitung menggunakan perbandingan ganda ANOVA satu arah. Analisis data antimikroba untuk konsentrasi yang berbeda diuji dengan tingkat signifikansi P < 0,05.
Hasil dan Diskusi
AgNPs berhasil disintesis menggunakan ekstrak air kulit buah delima sebagai sumber zat pereduksi. Gambar 1a menunjukkan perak nitrat 0,1 mM yang dilarutkan dalam 250 mL DDH2 O untuk membuat larutan tidak berwarna. Kemudian, 10 mL ekstrak kulit berair ditambahkan dan dicampur dengan baik, dan campuran reaksi perlahan berubah menjadi warna coklat tua selama 24 jam, seperti yang terlihat pada Gambar 1b. Perubahan warna yang diamati selama sintesis AgNPs telah dilaporkan untuk reaksi serupa ketika beberapa jenis ekstrak bagian tanaman seperti daun, bunga, kulit, biji, dan buah digunakan. Perubahan warna disebabkan oleh AgNO3 berinteraksi dengan sumber tumbuhan dan direduksi dari perak nitrat menjadi unsur perak [18,19,20,21,22].
a 0,1 mM perak nitrat. b Warna berubah setelah P. granatum ekstrak kulit ditambahkan
Gambar 2 menunjukkan spektrum UV-Vis AgNP yang disintesis menggunakan ekstrak air kulit buah delima. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 2, pita absorbansi memiliki puncak pada 378 nm pada waktu reaksi 24, 48, dan 72 jam dengan intensitas masing-masing 0,96, 1,08, dan 1,16. Intensitas meningkat seiring waktu, karena reaksi memiliki lebih banyak waktu untuk terjadi, yang mengarah ke konsentrasi AgNP yang lebih tinggi. Data resonansi plasmon permukaan menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi AgNP menyebabkan peningkatan puncak AgNP, bertepatan dengan peningkatan jumlah perak tereduksi dari waktu ke waktu. Sebagai AgNO3 bereaksi membentuk AgNPs karena pelepasan elektron dari ekstrak buah delima, reaksi bersamaan mulai mengoksidasi radikal askorbat. Spektrum penyerapan UV-Vis serupa diamati dalam penelitian berbeda yang menghasilkan AgNP dari ekstrak kulit buah delima, dengan puncak serapan pada 371 nm [23].
Spektrum absorbansi UV-Vis dari AgNP yang disintesis pada 48 hingga 72 jam dalam interval waktu
Pola XRD dari AgNP yang disintesis hijau ditunjukkan pada Gambar. 3. Enam puncak difraksi intens diamati pada 2θ nilai berkisar dari 0 hingga 90, menunjukkan bahwa kita dapat menetapkan bidang 111, 200, 220, dan 311 dari kubus bermuka dengan ion Ag pusat. Spektrum XRD menunjukkan bahwa AgNP yang disintesis dibentuk menjadi struktur kristal. Hasil ini sesuai dengan pola XRD yang sebelumnya dipublikasikan di database JCPDS (No. 04-0783). Puncak kristal tak dikenal (*) diamati sesuai dengan oksida perak [24]. Gambar TEM NP kulit delima berair 0,1 mM ditunjukkan pada Gambar 4. Gambar ini menunjukkan partikel berbentuk bola dengan diameter berkisar antara 20 hingga 40 nm, dengan ukuran partikel rata-rata 26,95 nm. Laporan serupa telah dibuat mengenai nanosintesis NP menggunakan Actinidia deliciosa ekstrak buah [25]. Pengamatan SEM dari AgNPs yang disintesis (Gbr. 5) menunjukkan distribusi nanopartikel perak yang sama pada permukaan sel kulit buah delima. Dari gambar ini, ditentukan bahwa nanopartikel berbentuk bola, dengan diameter berkisar antara 20 hingga 40 nm, yang serupa dengan laporan sebelumnya tentang AgNP berbentuk bola dengan diameter mulai dari 34 hingga 50 nm yang diproduksi menggunakan Raphanus sativus Ekstrak kulit L. [26].
Pola XRD dari AgNP yang disintesis dari P. granatum ekstrak kulitnya
Gambar TEM dari AgNP yang disintesis dari P. granatum ekstrak kulitnya
Gambar SEM dari AgNP yang disintesis dari P. granatum ekstrak kulitnya
Dalam fitosintesis nanopartikel perak menggunakan ekstrak kulit buah delima yang disajikan di sini, ukuran nanopartikel yang diperoleh cukup menjanjikan untuk penghantaran obat. Ukuran nanopartikel yang kurang dari 100 nm dilaporkan berperan dalam pengembangan sistem cerdas, meningkatkan nilai terapeutik dan pencitraan serta penghantaran obat ke jaringan tertentu untuk memberikan terapi pelepasan terkontrol [27]. Ukuran dan bentuk nanopartikel mempengaruhi bioavailabilitas obat di jaringan target. Nanopartikel yang berukuran 100 nm dilaporkan menunjukkan serapan 2,5 kali lipat lebih besar jika dibandingkan dengan partikel berdiameter 1 m [28, 29]. Ukuran nanopartikel memainkan peran kunci dalam fungsi partikel, seperti degradasi, dinamika vaskular, penargetan, pembersihan, dan mekanisme serapan [30]. Selanjutnya, sifat nanokristalin dari AgNPs yang disintesis meningkatkan bio-distribusi dan farmakokinetik seperti yang dilaporkan [31, 32]. Pemanfaatan biowaste delima akan menjadi pendekatan baru terhadap pemanfaatan limbah, seperti yang dilaporkan sebelumnya [33].
Data dari studi EDX memberikan analisis kualitatif dan kuantitatif dari unsur-unsur yang ditemukan dalam nanopartikel yang disintesis, seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 6. Studi EDX memberikan rincian unsur konten NP yang disintesis dan memperkirakan bahwa NP terdiri dari 70% Ag berat. Unsur dan ikatan lain yang diidentifikasi dalam hasil termasuk C-K, O, C-U, Cu, dan K, yang masing-masing berhubungan dengan persentase kecil dari total massa. Laporan EDX memberikan bukti bahwa konsentrasi rendah 0,1 mM AgNO3 menghasilkan sejumlah besar AgNP yang disintesis. Hasil serupa dilaporkan untuk 0,3 mM AgNO3 yang dituangkan ke dalam air suling selama 3 jam dan dipanaskan hingga 300 °C, dan untuk 1, 2, dan 3 g ekstrak kulit buah delima dicampur dengan 30 mL air suling dan dipanaskan hingga 80 °C [34].
Gambar EDX dari AgNP yang disintesis dari P. granatum ekstrak kulit dengan analisis kuantitatif
Sifat antibakteri dari AgNPs sintesis delima diselidiki menggunakan sampel 25, 50, 75, dan 100 g/mL terhadap bakteri Gram-positif dan Gram-negatif melalui uji difusi sumur agar. Pelat agar dengan bakteri Gram-negatif E. koli , S. typhi , dan P. aeruginosa dan zona penghambatan ditunjukkan pada Gambar. 7a-c. Konsentrasi rendah dari AgNPs sintesis delima (25 dan 50 L) menunjukkan aktivitas penghambatan terhadap P. aeruginosa dan E. koli tapi tidak melawan S. typhi. Efek antimikroba serupa dari produk delima telah dilaporkan sebelumnya, di mana penghambatan terkuat diamati untuk E. koli , S. aureus , dan P. aeruginosa [35,36,37].
Efek antimikroba dan zona penghambatan AgNPs patogen Gram-negatif (a –c )
Efek antimikroba dan zona penghambatan AgNPs patogen Gram-positif (d –f )
Gambar 8a–c menunjukkan aktivitas antimikroba dari AgNP yang disintesis melawan patogen Gram-positif K. pneumonia , S. aureus , dan S. epidermidis . Aktivitas antimikroba diamati bahkan pada konsentrasi AgNP rendah (25 dan 50 μL) untuk K. pneumonia, dengan zona penghambatan masing-masing 9 dan 14 nm, dan terhadap S. aureus , dengan zona hambat masing-masing 6 dan 14 nm. Studi sebelumnya juga mengkonfirmasi penghambatan pertumbuhan bakteri Gram-positif yang diobati dengan NP yang disintesis [35,36,37,38]. Aktivitas antibakteri yang dievaluasi setelah terpapar AgNP yang disintesis menunjukkan zona penghambatan dalam kisaran 7 hingga 21 mm. Gambar 9 menyajikan efek penghambatan dari konsentrasi yang berbeda (25 hingga 100 L) dari P. granatum kupas AgNP pada E. koli , P. aeruginosa , S. typhi , K. pneumonia , S. aureus , dan S. epidermidis . Bahkan pada konsentrasi rendah AgNPs, aktivitas antibakteri yang baik diamati untuk semua mikroba, kecuali S. typhi , seperti yang dilaporkan sebelumnya [38].
Untuk menganalisis efek sitotoksik AgNPs, garis sel kanker usus besar (RKO:ATCC® CRL-2577™) digunakan. Pada hari ke 3, kami menemukan viabilitas 56% dengan pengobatan 12,5 g dan viabilitas 61% pada hari ke 5. Penurunan proliferasi yang signifikan secara keseluruhan diamati pada> 12,5 μg (Gbr. 10a), dan konsisten pada hari ke 5. Selanjutnya, gambar pewarnaan AO/EtBr mengkonfirmasi pengurangan proliferasi dengan memvisualisasikan koloni dan jumlah sel (Gbr. 10b). Menariknya, kami dapat mengamati sel dengan vakuola sitoplasma perinuklear pada 12,5 g (Gbr. 10b, c); proses ini mungkin merupakan rute degradasi dalam lisosom dalam proses autophagy untuk meningkatkan kematian sel terprogram. Namun, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengkonfirmasi efek AgNP pada fungsi autophagy. Dalam penelitian kami sebelumnya tentang AgNP yang disintesis menggunakan Pimpinella anisum biji, kami juga menemukan bahwa 12 g AgNP beracun bagi sel HCT116 dengan meningkatkan apoptosis atau nekrosis [12]. Konsentrasi AgNP yang rendah juga dilaporkan mampu menginduksi apoptosis [39]. Eksperimen saat ini dengan AgNP yang disintesis dengan Punica granatum ekstrak kulit juga menunjukkan toksisitas 55-62% dengan 12,5 g. Selain itu, pewarnaan AO/EtBr mengungkapkan gambaran yang jelas tentang kematian sel terprogram melalui autophagy.
Aktivitas antimikroba AgNPs terhadap patogen Gram-negatif dan Gram-positif
Sitotoksisitas AgNPs. a Proliferasi sel dan analisis viabilitas pada sel RKO. Perbandingan ganda ANOVA satu arah, ***P < 0,0005. b Analisis apoptosis/nekrosis pada sel RKO. c Sel RKO terkena dosis AgNP yang berbeda
Kesimpulan
Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak kulit buah delima adalah agen pereduksi yang baik untuk mensintesis nanopartikel perak dengan kisaran ukuran 20–40 nm (ukuran rata-rata, 26,95 nm), prasyarat ideal untuk penghantaran obat yang efisien dan untuk meningkatkan bioavailabilitas pada tingkat yang lebih rendah. situs sasaran. Aktivitas antibakteri dari AgNP yang disintesis pada organisme yang diuji, bahkan pada konsentrasi AgNP yang rendah (25–100 L), lebih lanjut menegaskan efisiensi antibiotik dari AgNP yang disintesis secara hijau untuk pengembangan agen antibakteri baru untuk pengobatan terhadap Gram-negatif dan Gram -patogen positif Selain itu, efek sitotoksik AgNP yang diamati pada garis sel kanker usus besar dan pengurangan proliferasi sel pada tingkat dosis> 12,5 μg lebih lanjut mempromosikan AgNP sebagai pengobatan lini pertama untuk tumor.
